衡阳师范学院学报

2022, v.43;No.247(03) 89-94

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

人KLK7基因的表达及其对细胞增殖与凋亡的影响
On Expression of Human KLK7 Gene and Its Effects on Cell Proliferation and Apoptosis

王芳宇;侯鑫军;喻娇;隆泽桧;高翠翠;蔡林娜;何丽芳;唐青海;

摘要(Abstract):

本研究旨在对人激肽释放酶7 (KLK7)基因进行原核与真核表达,研究其功能,并为后续KLK7新型生物抑制剂的研制提供基础材料。采用PCR扩增KLK7基因,将其克隆至原核表达载体pGEX4T-1和真核表达载体pEGFP-C1,构建重组表达质粒pGEX4T-1-KLK7和pEGFP-C1-KLK7,分别转化Transetta (DE3)和DH5α感受态细胞,筛选阳性菌株,用IPTG诱导重组KLK7蛋白(rKLK7)表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达情况。将pEGFP-C1-KLK7转染人角质形成细胞HaCaT,观察KLK7在细胞中的定位,检测KLK7基因过表达对角质化细胞增殖的影响。KLK7基因开放阅读框为762 bp,编码254个aa。原核系统表达的rKLK7分子量为53.5 kDa。EGFP-KLK7融合蛋白定位在细胞质。KLK7的过表达对HaCaT细胞的增殖有一定的抑制作用,但差异不显著(P>0.05)。DNA检测表明,KLK7过表达可促进HaCaT细胞的凋亡。KLK7在原核表达系统和真核细胞中均成功表达,KLK7蛋白过表达对HaCaT细胞的增殖有一定的抑制作用,而对细胞凋亡有一定的促进作用。

关键词(KeyWords): 人激肽释放酶7;原核表达;真核表达;增殖;凋亡

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 湖南省自然科学联合基金项目(2019JJ60022,2020JJ6042)

作者(Authors): 王芳宇;侯鑫军;喻娇;隆泽桧;高翠翠;蔡林娜;何丽芳;唐青海;

DOI: 10.13914/j.cnki.cn43-1453/z.2022.03.020

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享